實驗流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

?

特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注：上述樣品建議經(jīng)過增菌后，收集培養(yǎng)物用于檢測。 
二、DNA提取：
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液，按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品，并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物：取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中，8000rpm離心3min，盡量吸棄上清，加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物：挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品：挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中，加入0.5mL生理鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心3分鐘，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標本：取標本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注：陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取)，直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。 
大鼠頜下腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL羥基脫氫羧酸鹽Hydroxydehydro Nifedipine Carboxylate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

MCA38小鼠結(jié)腸癌細胞 MCA38 mouse colon cancer cells DMEM+10%FBS-d7Nimodipine-d7質(zhì)量規(guī)格：美國進口

NRG4 Protein Human 重組人 NRG4 蛋白奧洛他定N氧化物Olopatadine N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

PA319(人大腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)奧洛他定鹽酸鹽-d6Olopatadine-d6 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

少突膠質(zhì)前體分化生長添加物OPCDS外消旋去乙基奧昔布寧鹽酸鹽rac Desethyl Oxybutynin 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細胞;M6194-甲氧基-4'-硝基芪(>98.0%(GC))4-Methoxy-4'-nitrostilbene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M1 豬髖動脈內(nèi)皮細胞，PIEC細胞 CRL-1548細胞，大鼠肝癌細胞5-硝基(>99.0%(HPLC)(T))5-Nitrouracil質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T)

人羊膜細胞;HA2-羥基單鈉鹽二水合物2-Hydroxy Atorvastatin Dihydrate Mo Salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CD68 Others Human 人 CD68 / Macrosialin / Gp110 人細胞裂解液 (陽性對照) 內(nèi)酯Atorvastatin Lactone質(zhì)量規(guī)格：美國進口

荷蘭白花奶肺細胞;DCL1 ?；?/span>-β-D-葡萄糖醛酸苷 70%, 含 30% 內(nèi)酯Atorvastatin Acyl-β-D-glucuronide 70%, contains up to 30% lactone質(zhì)量規(guī)格：美國進口
NCI-H1703(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 PA317(成纖維細胞)心鈉素Ⅲ，大鼠質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRAtriopeptin III (rat)

組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml帶3蛋白質(zhì)（547-553），人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRBand 3 Protein (547-553)(human)

MET Others Rat 大鼠 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 帶3蛋白質(zhì)（824-829），人質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRBand 3 Protein (824-829)(human)

人胰腺腺泡上皮癌;HPAC堿性成纖維生長因子質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRbFGF (119 - 126), BasicFibroblast Growth Factor,human, bovin

HMC細胞，人腎小球系膜細胞 產(chǎn)EBV的絨猴白細胞,B95-8細胞 CL-0218SPC-A-1(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2心得安乙二醇質(zhì)量規(guī)格：美國進口Propralol glycol
陳皮探針法PCR鑒定試劑盒*RNASE1 Others Human 人 RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 人細胞裂解液 (陽性對照) D-rleucineD-正白酸1克BR，98%

骨髓間質(zhì)干細胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells煌綠乳糖膽鹽肉湯 Brillicnt Grqqn Lcctosq Bilq Broth

HME1細胞，人色素瘤細胞 長雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;Mao3,3',5,5'-四甲基聯(lián)... 3,3',5,5'-Tetram
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。