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  酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)  是ELISA的簡(jiǎn)稱(chēng)。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。ELSIA試驗(yàn)所用試劑器材：

一、試劑：

1、　包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):

NaCO31.59克　NaHCO3　2.93克　　加蒸餾水至1000ml

2、洗滌緩沖液(PH7.4PBS)：0.15M　KH2PO40.2克　Na2HPO4·12H2O　2.9克　NaCl8.0克KCl0.2克Tween-200.05％0.5ml加蒸餾水至1000ml

3、　稀釋液:牛血清白蛋白(BSA)0.1克　加洗滌緩沖液至100ml　或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。

4、終止液(2MH2SO4）：蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。

5、底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml　0.1M檸檬酸(19.2克/L)24.3ml　加蒸餾水50ml。

6、TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5)10ml0.75%H2O232μl

7、ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物緩沖液(PH5.5)1ml　3%H2O2　2μl

8、抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。

9、正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。

二.　器材:

1、聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱(chēng)酶標(biāo)板)40孔或96孔，ELISA檢測(cè)儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。

2、　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。

3、4℃冰箱，37℃孵育箱。